臺(tái)盼藍(lán)溶液0.4%

產(chǎn)品貨號(hào)：C0040

儲(chǔ)存條件：4℃，12個(gè)月

產(chǎn)品性質(zhì)

別名：錐藍(lán)或錐蟲(chóng)藍(lán)

分子式：C34H24N6Na4O14S4

分子量：960.81

CAS:72-57-1

產(chǎn)品描述

臺(tái)盼藍(lán)是一種陰離子型染料。Trypan blue不能透過(guò)活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色，即產(chǎn)生所謂的拒染現(xiàn)象,而死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增加，可使染料通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使死細(xì)胞著色呈藍(lán)色，是常用的檢測(cè)細(xì)胞活率的方法。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡，這與中性紅作用相反。因此，借助臺(tái)盼藍(lán)染色可以非常簡(jiǎn)便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。臺(tái)盼藍(lán)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。

Trypan blue stain(0.4%)常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性以及細(xì)胞是否存活。活細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色，而死細(xì)胞會(huì)被染成淡藍(lán)色。臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。臺(tái)盼藍(lán)染色后，通過(guò)顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量，0.4%為常用的濃度。

自備材料：PBS   細(xì)胞ji數(shù)板 顯微鏡

參考步驟

1、收集細(xì)胞:

如為貼壁細(xì)胞，應(yīng)用yi蛋白酶- EDTA溶液消化細(xì)胞，收集細(xì)胞。

如果收集懸浮細(xì)胞，則可以直接收集細(xì)胞。收集好的細(xì)胞在1000~ 2000g離心1min , 棄上清，用1mIPBS重新懸浮細(xì)胞沉淀。

2、臺(tái)盼藍(lán)染色:

吸取100μl細(xì)胞懸液到1.5ml或0.5ml離心管內(nèi),加入100μl Trypan blue stain(0.4%)輕輕混勻，靜置染色3min(染色時(shí)間可適當(dāng)延長(zhǎng)，但不宜超過(guò)10min)。

3、細(xì)胞計(jì)數(shù):

吸取經(jīng)過(guò)染色后的細(xì)胞，用血細(xì)胞ji數(shù)板計(jì)數(shù)。通常如果要比較精確地進(jìn)行定量，每個(gè)細(xì)胞樣品至少需要數(shù)500個(gè)細(xì)胞,數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。細(xì)胞存活率計(jì)算公式如下:

細(xì)胞存活率= (細(xì)胞總數(shù)-藍(lán)色細(xì)胞數(shù))/細(xì)胞總數(shù)x 100%

注意事項(xiàng)

1、Trypan blue stain對(duì)人體有輕微毒性,請(qǐng)注意小心防護(hù)。

2、注意凋亡小體偶爾也有臺(tái)盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。

3、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。